Xét nghiệm huyết thanh học: chủng loại, sử dụng

chẩn đoán phòng thí nghiệm của hầu như tất cả các bệnh truyền nhiễm được dựa trên việc phát hiện máu trong kháng thể của bệnh nhân, được sản xuất bởi các kháng nguyên mầm bệnh, các phương pháp huyết thanh học. Họ đi vào hành nghề y vào cuối XIX - đầu thế kỷ XX.

Sự phát triển của khoa học đã giúp xác định cấu trúc kháng nguyên của vi khuẩn và các công thức hóa học của chất độc của họ. Nó có thể tạo ra huyết thanh không chỉ chữa bệnh mà còn chẩn đoán. Họ thu được bằng cách quản lý các mầm bệnh suy yếu động vật trong phòng thí nghiệm. Sau vài ngày ngâm thỏ máu hoặc chuột các sản phẩm sử dụng cho việc xác định các vi khuẩn hoặc độc tố của chúng bằng các xét nghiệm huyết thanh học chuẩn bị.

Các biểu hiện bên ngoài của phản ứng này phụ thuộc vào các điều kiện của việc xây dựng và tình trạng kháng nguyên trong máu của bệnh nhân. Nếu vi khuẩn là các hạt không hòa tan, họ giải quyết, lysed, cố định hoặc bị ràng buộc trong huyết thanh. Nếu kháng nguyên có thể hoà tan, nó xuất hiện hiện tượng trung hòa hoặc kết tủa.

ngưng kết (PA)

thử nghiệm ngưng kết huyết thanh là rất cụ thể. Nó rất dễ dàng để thực hiện và là khá rõ ràng để nhanh chóng phát hiện sự hiện diện của kháng nguyên trong huyết thanh bệnh nhân. Nó được sử dụng để thiết lập Vidal phản ứng (chẩn đoán mắc bệnh thương hàn và phó thương hàn) và Weigl (sốt phát ban).

Nó dựa trên một sự tương tác cụ thể giữa các kháng thể con người (hoặc agglutinins) và các tế bào vi sinh vật (agglyutenogenami). Sau sự tương tác của họ được hình thành hạt kết tủa. Đây là một dấu hiệu tích cực. Đối với thiết phản ứng có thể được sử dụng đại lý sống hay đã chết vi khuẩn, nấm, động vật nguyên sinh, tế bào máu và tế bào soma.

phản ứng hóa học được chia thành hai giai đoạn:

1. Cụ thể kháng thể hợp chất (AT) với kháng nguyên (Ag).
2. Không đặc hiệu - sự lắng đọng của các tập đoàn AG-AT, tức là sự hình thành của làm cho dính.

Phản ứng ngưng kết gián tiếp (TPHA)

Phản ứng này là nhạy cảm hơn so với trước đó. Nó được sử dụng để chẩn đoán các bệnh do vi khuẩn, ký sinh trùng nội bào, động vật nguyên sinh. Nó là như vậy cụ thể mà có thể phát hiện thậm chí nồng độ rất thấp của kháng thể.

Đối với việc xây dựng của nó sử dụng các tế bào máu đỏ tinh khiết cừu và các tế bào máu đỏ của con người điều trị bằng kháng thể hoặc kháng nguyên (nó phụ thuộc vào những gì trong phòng thí nghiệm muốn tìm). Trong một số trường hợp, các tế bào máu đỏ của con người được điều trị bằng globulin miễn dịch. Huyết thanh phản ứng của tế bào hồng cầu được coi là hợp lệ nếu kết tủa đó xảy ra ở phía dưới của ống. Phản ứng tích cực chúng ta có thể nói rằng khi các tế bào được sắp xếp theo hình dạng của một chiếc ô đảo, chiếm toàn bộ đáy. Phản ứng tiêu cực được ghi khi các tế bào máu đỏ giải quyết theo hình thức của một cột hoặc các nút ở trung tâm của đáy.

phản ứng kết tủa (RP)

phản ứng huyết thanh học thuộc loại này được dùng để xác định các hạt kháng nguyên vô cùng nhỏ. Đây có thể là, ví dụ, protein (hoặc các phần của chúng), các hợp chất của protein với lipid hoặc carbohydrate, một phần của vi khuẩn và độc tố của chúng.

Sera cho phản ứng thu được bằng cách phá hoại nhân tạo các loài động vật, điển hình là thỏ. Trong phương pháp này, bạn có thể nhận hoàn toàn bất kỳ huyết thanh kết tủa. Staging huyết thanh học kết tủa cơ chế tương tự của hành động trên ngưng kết. Các kháng thể chứa trong các ràng buộc huyết thanh với các kháng nguyên trong dung dịch keo để tạo thành phân tử protein lớn, được lắng đọng trên đáy của ống hoặc trên bề mặt (gel). Phương pháp này được coi là rất cụ thể và có thể phát hiện thậm chí một lượng nhỏ của chất.

Được sử dụng để chẩn đoán bệnh dịch hạch, bệnh tularemia, bệnh than, bệnh viêm màng não và các bệnh khác. Cũng liên quan đến việc giám định pháp y.

kiểm tra kết tủa gel

xét nghiệm huyết thanh học có thể được thực hiện không chỉ trong môi trường lỏng, nhưng trong gel agarose. Đây được gọi là phương pháp kết tủa khuếch tán. Với nó, nghiên cứu các thành phần của hỗn hợp kháng nguyên phức tạp. Phương pháp này được dựa trên hoá hướng về kháng nguyên cho các kháng thể, và ngược lại. Gel chúng di chuyển về phía nhau ở tốc độ khác nhau và họp để tạo dòng kết tủa. Mỗi dòng - một bộ K-AT.

Trung hòa exotoxin thuốc kháng độc (RN)

huyết thanh chống độc có thể trung hòa exotoxin mà vi sinh vật sản xuất. Dựa trên dữ liệu này và xét nghiệm huyết thanh học. Vi sinh vật sử dụng phương pháp này để chuẩn độ huyết thanh, chất độc và Biến độc tố, cũng như hoạt tính điều trị của họ. Sức mạnh của trung hòa độc tố được xác định bởi các đơn vị thông thường - AE.

Hơn nữa, do phản ứng này có thể xác định các loài hoặc các loại thuộc exotoxin. Nó được sử dụng trong chẩn đoán uốn ván, bạch hầu, bệnh ngộ độc. Nghiên cứu này có thể được thực hiện "trên kính", và trong một gel.

phản ứng ly giải (RL)

Huyết thanh miễn dịch, mà đi vào cơ thể của bệnh nhân, có, ngoài chức năng chính của nó miễn dịch thụ động, thậm chí và tài sản lytic. Nó có khả năng hòa tan chất của vi sinh vật, các yếu tố tế bào và ngoại vi rút xâm nhập vào cơ thể của bệnh nhân. Tùy thuộc vào tính đặc hiệu của kháng thể trong huyết thanh bị cô lập bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins và khác.

Những kháng thể đặc hiệu được gọi là "bổ sung". Nó được tìm thấy ở hầu hết các dịch cơ thể, nó có một cấu trúc protein phức tạp và rất nhạy cảm với nhiệt độ tăng, run rẩy, axit và ánh sáng mặt trời trực tiếp. Nhưng trong tình trạng khô có thể duy trì tính lytic của họ lên đến sáu tháng.

Có một số loại xét nghiệm huyết thanh học thuộc loại này:

- bacteriolysis;

- tán huyết.

Bacteriolysis được thực hiện bằng cách sử dụng huyết thanh của bệnh nhân và huyết thanh miễn dịch đặc hiệu với vi khuẩn sống. Nếu, sau đó các nhà nghiên cứu nhìn thấy những ly giải của vi khuẩn, và phản ứng sẽ được coi là đủ số lượng bổ sung tích cực hiện diện trong máu.

Các phản ứng huyết thanh máu thứ hai là việc đình chỉ của hồng cầu điều trị trong huyết thanh có chứa hemolysins bệnh nhân, được kích hoạt chỉ trong sự hiện diện của một lời khen cụ thể. Nếu có một, sau đó phòng thí nghiệm theo dõi sự tan rã của các tế bào máu đỏ. Phản ứng này được sử dụng rộng rãi trong y học hiện đại để xác định hiệu giá của bổ sung (ví dụ, số tiền nhỏ nhất của nó kích động ly giải tế bào máu đỏ) trong huyết thanh máu và để sản xuất khảo nghiệm bắt buộc bổ sung. Đó là theo cách này tiến hành phản ứng huyết thanh giang mai - Wasserman.

cố định bổ thể (RSK)

Phản ứng này được sử dụng để phát hiện kháng thể trong huyết thanh cho bệnh nhân của một tác nhân gây bệnh cũng như để xác định người khởi tạo cấu trúc kháng nguyên của nó.

Tính đến thời điểm này, chúng tôi đã mô tả một xét nghiệm huyết thanh học đơn giản. RAC coi phản ứng khó khăn, vì nó tương tác không phải là hai, nhưng ba yếu tố: một kháng thể, kháng nguyên và bổ sung. bản chất của nó nằm trong thực tế là sự tương tác giữa kháng thể và kháng nguyên xảy ra chỉ trong sự hiện diện của protein khen mà được hấp phụ trên bề mặt của hình thành phức tạp K-AT.

Tự kháng nguyên sau khi bổ sung bổ sung, tùy thuộc vào những thay đổi đáng kể, trong đó chỉ ra chất lượng của các phản ứng. Đây có thể là ly giải, tán huyết, cố định, diệt khuẩn hoặc tác dụng kìm khuẩn.

Phản ứng tự xảy ra trong hai giai đoạn:

1. Sự hình thành kháng thể kháng nguyên, mà không phải là trực quan nghiên cứu đáng chú ý.
2. Thay đổi kháng nguyên dưới tác động của bổ sung. Giai đoạn này thường có thể được truy được bằng mắt thường. Nếu đáp ứng thị giác không hiển thị, sau đó sử dụng hệ thống chỉ tiêu bổ sung cho phép để phát hiện những thay đổi.

hệ thống chỉ tiêu

Phản ứng này được dựa trên các ràng buộc của bổ sung. Các ống nghiệm giờ sau khi cài đặt RSK thêm hồng cầu cừu tinh khiết và tan máu trong huyết thanh không chứa bổ sung. Nếu ống còn lại bổ sung cởi ra, nó sẽ tham gia vào phức tạp N-AT hình thành giữa các tế bào máu cừu và hemolysin, và gây tan rã của họ. Điều này có nghĩa rằng DGC là tiêu cực. Nếu các tế bào máu đỏ vẫn còn nguyên vẹn, sau đó, cho phù hợp, phản ứng tích cực.

Hemagglutin (RHA)

Có hai Hemagglutin cơ bản khác nhau. Một trong số đó - huyết thanh học, nó được sử dụng để xác định nhóm máu. Trong trường hợp này hồng cầu tương tác với kháng thể.

Và phản ứng thứ hai là không có liên quan tới huyết thanh học, vì các tế bào máu đỏ phản ứng với hemagglutinin sản xuất bởi virus. Vì mỗi exciter hoạt động chỉ trên hồng cầu cụ thể (gà, cừu, khỉ), chúng ta có thể giả định phản ứng này trong gang tấc cụ thể.

Rõ ràng phản ứng tích cực hay tiêu cực, nó có thể cho vị trí của các tế bào máu ở đáy của ống. Nếu họ tìm giống một chiếc ô ngược, sau đó virus mong muốn hiện diện trong máu của bệnh nhân. Và nếu tất cả các tế bào máu đỏ được hình thành như một cột đồng xu, không có mầm bệnh chưa được biết.

Phản ứng ức chế Hemagglutin (HAI)

Đây phản ứng đặc hiệu cao, cho phép thành lập các hình thức, loại virus hoặc sự hiện diện của kháng thể đặc hiệu trong huyết thanh máu của bệnh nhân.

bản chất của nó nằm trong thực tế rằng các kháng thể thêm vào ống chứa vật liệu kiểm tra, ngăn chặn sự lắng đọng của các kháng nguyên trên hồng cầu, do đó ngăn chặn Hemagglutin. Đây là một dấu hiệu cho thấy chất lượng của sự hiện diện của kháng nguyên cụ thể trong máu đến một loại virus mong muốn cụ thể.

Phản ứng miễn dịch huỳnh quang (RIF)

Phản ứng được dựa trên khả năng nhận diện phức hợp với kính hiển vi huỳnh quang AT-AH sau khi thuốc nhuộm điều trị flyuorohromnymi. Phương pháp này là đơn giản để sử dụng, không yêu cầu cô lập về văn hóa tinh khiết và mất ít thời gian. Nó là không thể thiếu cho việc chẩn đoán nhanh các bệnh truyền nhiễm.

Trên thực tế, các xét nghiệm huyết thanh học được chia thành hai loại: trực tiếp và gián tiếp.

Direct RIF sản xuất kháng nguyên mà trước đây xử lý huyết thanh huỳnh quang. Và gián tiếp là thuốc được điều trị đầu tiên với diagnosticum thông thường bao gồm các kháng thể với kháng nguyên cần thiết rồi lại áp dụng whey huỳnh quang, mà là cụ thể cho các protein của khu phức hợp K-AT, và các tế bào vi khuẩn trở nên nhìn thấy được bằng kính hiển vi.