Phương pháp vi sinh để nghiên cứu nước, đất và không khí

Vi sinh vật - nhỏ, chủ yếu là đơn bào sinh vật, đó là phổ biến trong tự nhiên. Chúng được tìm thấy trong tất cả các phương tiện truyền thông (không khí, đất, nước) ở người và động vật, trong thực vật.

đa dạng về chất lượng và số lượng sinh vật phụ thuộc chủ yếu vào các hợp chất dinh dưỡng. Nhưng nó cũng rất quan trọng như độ ẩm, nhiệt độ, sục khí và tác dụng của ánh sáng mặt trời và các yếu tố khác.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Các phương pháp truyền thông tự nhiên vệ sinh và nghiên cứu vi sinh vật có thể phát hiện sự hiện diện của mầm bệnh và để xác định số tiền của họ phù hợp với các kết quả thu được, để phát triển các biện pháp để loại bỏ hoặc ngăn chặn bệnh truyền nhiễm. Bên cạnh đó, tài khoản định lượng là cần thiết cho mô hình hệ sinh thái và sự phát triển của quá trình tự nhiên của quản lý. . Chúng ta hãy xem xét thêm các phương pháp kiểm tra vi sinh là gì.

đất

Nó được coi bởi các học giả là một trong những tuyến đường có thể lây truyền các bệnh lý nhiễm trùng. Với dịch tiết của con người hoặc động vật bệnh nhân trong các mầm bệnh xâm nhập đất. Một số trong số họ, đặc biệt, bào tử, có thể tồn tại trong đất trong một thời gian dài (đôi khi trong nhiều thập niên). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Các mầm bệnh vào mùa thu đất nhiễm nguy hiểm như vậy như uốn ván, bệnh than, bệnh ngộ độc, và vân vân. Phương pháp nghiên cứu vệ sinh-vi sinh của đất cho phép bạn xác định "số vi khuẩn" (số lượng vi sinh vật trong đất của một gram), và chỉ số coli (số lượng E. coli) .

phân tích đất: tổng quan

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Các phương pháp kiểm tra vi sinh vật của đất nên được chủ yếu nhờ kính hiển vi chỉ đạo và văn hóa trên rắn môi trường dinh dưỡng. Quần thể vi sinh vật và các nhóm của họ mà sống đất, khác nhau về tình hình phân loại và chức năng sinh thái. Trong khoa học, họ được thống nhất dưới thuật ngữ chung chung "sinh vật đất." Primer - môi trường sống số lượng lớn các vi sinh vật. Trong gam đất có mặt từ 1 đến 10 tỷ tế bào của họ. Trong môi trường này, tích cực có phân hủy các chất hữu cơ, với sự tham gia của các vi sinh vật hoại sinh khác nhau.

nghiên cứu vi của phương pháp vi sinh: các bước

Phân tích các phương tiện bắt đầu bằng việc lấy mẫu. Với mục đích này, trước đó bóc vỏ và dao rượu grated (xẻng có thể được sử dụng). Sau đó, việc chuẩn bị mẫu. Bước tiếp theo - đếm tế bào smears màu. Xem xét từng bước riêng rẽ.

lấy mẫu

Trong phân tích đất nông nghiệp có xu hướng mẫu lấy từ độ sâu của toàn bộ lớp. Đầu tiên lấy ra 2-3 cm so với mặt đất, vì nó có thể có mặt trong một hệ vi sinh không liên quan. Sau đó, với diện tích đất nghiên cứu đưa monoliths. Chiều dài của mỗi người trong số họ phải tuân theo các độ dày của lớp mà từ đó bạn muốn lấy mẫu.

Trên một lô 100-200 vuông. 7-10 m mẫu được lựa chọn. Trọng lượng của mỗi - trật tự là 0,5 kg. Các mẫu phải được trộn đều trong túi. Sau đó lấy mẫu trung bình nặng khoảng 1 kg. Nó nên được đặt trong giấy da gói (vô trùng) kèm theo trong một túi vải. Trước chỉ đạo phân tích các mẫu được lưu trữ trong tủ lạnh.

Khảo sát Chuẩn bị

Đất khuấy đổ trên kính khô. Của nó trước khi lau bằng cồn và ghi phía trên burner. Với một đất spatula trộn đều và mở rộng đồng đều. Nó là bắt buộc để loại bỏ các rễ và yếu tố nước ngoài khác. Để làm điều này, sử dụng nhíp. Trước khi nhíp vận hành và thìa phía trên burner đốt cháy và cho phép để làm mát.

Của thửa đất khác nhau phân bố trên kính, chọn phần nhỏ. Họ cân nhắc trong một món ăn bằng sứ trên thang điểm kỹ thuật. является специальная обработка образца. bước phương pháp vi bắt buộc của các nghiên cứu vi sinh là quá trình xử lý đặc biệt của mẫu. 2 phải được chuẩn bị trước, bình vô trùng. kích thước của chúng không được vượt quá 250 ml. Một trong những bình được đổ vào 100 ml nước máy. Bởi vì phải mất 0,4-0,8 ml mẫu chất lỏng của đất và làm ẩm để một dán. Hỗn hợp nên được cọ xát với một ngón tay hoặc cao su chày trong 5 phút.

Nước từ bình đầu tiên được chuyển vào khối đất bình rỗng. Hơn nữa, chà xát lưng. Sau hàng loạt này được chuyển giao cho một bình gần ngọn lửa đốt. Container treo đất đã lắc trên máy lắc trong 5 phút. Sau đó, nó được phép giải quyết cho khoảng 30 giây. Này là cần thiết để cho phép các hạt lớn để giải quyết. Sau một nửa khối lượng phút được sử dụng để chuẩn bị công tác chuẩn bị.

số lượng tế bào trên smears cố định

, разработанному Виноградским. nghiên cứu vi trực tiếp của đất được thực hiện theo phương pháp nghiên cứu vi sinh vật, phát triển Vinogradskii. Về khối lượng nhất định của hệ thống treo được tính số lượng tế bào của vi sinh vật. Nghiên cứu smears cố định có thể lưu trữ ma túy trong thời gian dài và thực hiện các tính toán bất cứ lúc nào.

Chuẩn bị của thuốc như sau. Một số tiền nhất định của bùn (thường là 0,02-0,05 ml) được áp dụng với một micropipette lên slide. Để giải pháp này đã được bổ sung một giọt agar-agar (polysaccharide agaropectin hỗn hợp và agarose chiết xuất từ tảo nâu và đỏ Biển Đen), khuấy nhanh và lây lan trên diện tích 4-6 vuông. cm. Pap không khí khô và cố định trong 20-30 phút. rượu (96%). Tiếp theo, thuốc làm ẩm bằng nước cất và đặt trong p-p carbolic erythrosin 20-30 phút.

Sau khi nhuộm, nó được rửa sạch và làm khô trong không khí. số lượng tế bào thực hiện từ ống kính ngâm.

Gieo trên môi trường rắn

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. phương pháp vi để kiểm tra vi sinh vật có thể phát hiện một số lượng lớn các vi sinh vật. Nhưng bất chấp điều này, phương pháp cấy là phổ biến nhất trong thực tế. bản chất của nó bao gồm trong gieo hạt lượng thuốc (treo đất) trong một đĩa Petri trên môi trường rắn.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Phương pháp này nghiên cứu vi sinh vật sẽ đưa vào tài khoản không chỉ về số lượng mà còn nhóm, và trong một số trường hợp, và thành phần loài thực vật cực nhỏ. Đếm số khuẩn lạc được sản xuất, thường là từ tận đáy đĩa Petri trong ánh sáng truyền đi. Trên diện tích tính đặt điểm đánh dấu hoặc mực dấu chấm.

Phân tích nước

Các hệ vi sinh của cơ thể nước, như một quy luật, phản ánh các thành phần vi khuẩn trong đất xung quanh nó. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. Trong bối cảnh này, các phương pháp phân tích vệ sinh-vi sinh của nước và đất có tầm quan trọng thực tiễn đặc biệt trong việc nghiên cứu tình trạng của một hệ sinh thái đặc biệt. Các nước ngọt chứa, như một quy luật, cầu khuẩn, vi khuẩn hình que.

Vi khuẩn yếm khí trong nước tìm thấy với số lượng nhỏ. Như một quy luật, chúng nhân lên ở dưới cùng của cơ quan của nước, trong bùn, tham gia vào quá trình thanh lọc. đại dương hệ vi sinh và biển thuận lợi đại diện cây ưa mặn vi khuẩn (ưa mặn).

Trong nước, giếng phun là thực tế không có vi sinh vật. Điều này là do khả năng lọc của lớp đất.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. phương pháp truyền thống nghiên cứu nước vi sinh coi là định nghĩa của chỉ số nếu vi khuẩn và coli-hiệu giá hoặc. Chỉ số đầu tiên xác định số lượng vi khuẩn trong 1 ml chất lỏng. Coli chỉ số đại diện cho số coliforms hiện diện trong một lít nước, và nếu hiệu giá - số lượng tối thiểu hoặc chất lỏng pha loãng tối đa, trong đó họ vẫn có thể được phát hiện.

Xác định số lượng vi khuẩn

Phương pháp này vệ sinh kiểm tra vi sinh của nước là như sau. Trong 1 ml nước được xác định số lượng vi khuẩn yếm khí mesophilic và tuỳ ý (trung gian) hiếu khí có khả năng vào thịt-peptone agar (trung tiểu học) ở 37 DEG. vào ban ngày để tạo thành thuộc địa nhìn thấy ở độ phóng đại 2-5 p. hoặc bằng mắt thường.

является посев. Các bước quan trọng của phương pháp phân tích vi sinh của nước được gieo. Bởi vì mỗi mẫu được gieo ít nhất 2 khối lượng khác nhau. Khi phân tích nước máy trong mỗi cốc được làm bằng 1-0,1 ml chất lỏng tinh khiết và ô nhiễm 0,01-0,001 ml. Đối với cấy 0,1 ml hoặc khối lượng nhỏ hơn của chất lỏng được pha loãng với chưng cất (vô trùng) nước. Luôn chuẩn bị pha loãng thập phân. 1 ml mỗi trong số họ được thực hiện trong hai đĩa petri.

Chăn nuôi chứa đầy thạch dinh dưỡng. đầu tiên nó phải tan chảy, và mát mẻ đến 45 DEG. Sau khi khuấy, môi trường hoạt động còn lại trên một bề mặt ngang cho kiên cố. Tại 37 độ. cây được trồng trong suốt cả ngày. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Phương pháp coi nghiên cứu nước vi sinh sẽ đưa vào tài khoản kết quả của những món ăn nơi số khuẩn lạc trong phạm vi từ 30 đến 300.

không khí

Nó được coi là một mặt bằng quá cảnh cho các vi sinh vật. являются седиментация (оседание) и аспирация. Các phương pháp chính của nghiên cứu vi sinh là trầm tích không khí (giải quyết) và khát vọng.

môi trường không khí hệ vi sinh được tùy tiện chia thành biến và liên tục. Nhóm thứ nhất bao gồm nấm men, cầu khuẩn chromogenic, bào tử mang trực khuẩn coli và vi sinh vật khác có khả năng kháng sấy, tiếp xúc với ánh sáng. Đại diện biến vi, thâm nhập vào không khí từ môi trường sống bình thường của họ, dài duy trì sức sống của họ.

Trong không khí của thành phố lớn vi sinh vật nhiều hơn trong môi trường không khí của khu vực nông thôn. Trên các vùng biển, rừng rất ít vi khuẩn. thanh lọc không khí tạo điều kiện kết tủa: tuyết và mưa. vi khuẩn ở trong nhà nhiều hơn trong không gian mở. số của họ được tăng lên vào mùa đông trong trường hợp không thông gió thường xuyên.

lắng

считается простейшим. Phương pháp này nghiên cứu vi sinh trong vi sinh học được coi là đơn giản nhất. Nó được dựa trên giải quyết của các giọt và các hạt trên bề mặt thạch trong một đĩa Petri mở dưới lực hấp dẫn. phương pháp lắng có thể không xác định chính xác số lượng vi khuẩn trong không khí. Thực tế là trong một cốc mở để đón những hạt mịn của các hạt bụi và những giọt vi khuẩn khá khó khăn. Trên bề mặt giữ lại các hạt chủ yếu lớn.

Phương pháp này không được sử dụng để phân tích không khí. Môi trường này đặc trưng bởi những biến động lớn trong tốc độ của luồng khí. Lắng có thể, tuy nhiên, được sử dụng trong sự vắng mặt của các thiết bị phức tạp hơn hoặc nguồn điện.

Xác định số lượng vi khuẩn thực hiện bằng phương pháp Omelyansky. Theo hợp thì trong 5 phút trên một diện tích bề mặt của 100 agar vuông. cm lắng một số vi khuẩn có mặt trong 10 lít không khí.

Đặt hàng 535 "Trên thống nhất của phương pháp vi sinh điều tra"

phân tích vi khuẩn chiếm một vị trí quan trọng trong các hoạt động lâm sàng và xét nghiệm phức tạp nhằm chẩn đoán, phòng ngừa và điều trị các bệnh truyền nhiễm khác nhau. Tuy nhiên, các nghiên cứu về môi trường, họ không giới hạn.

Đặc biệt quan trọng là việc phân tích vi khuẩn của vật liệu sinh học tại các bệnh viện. Đối với nghiên cứu được tiến hành tại các cơ sở y tế, tăng yêu cầu. Mục đích của Dòng "Trên thống nhất của phương pháp vi sinh điều tra" là để cải thiện việc phân tích vi khuẩn, nâng cao chất lượng và hiệu quả của chẩn đoán vi sinh.

soi dịch smears ở phụ nữ

Nó là một phương pháp quan trọng của phân tích cho việc chẩn đoán các bệnh nhiễm trùng, bệnh lây truyền qua đường tình dục, và nhiễm trùng cơ hội (vi khuẩn cơ hội).

phân tích vi để đánh giá thành phần định tính và định lượng của hệ vi sinh, kiểm tra tính chính xác của việc lấy mẫu. Ví dụ, sự có mặt của biểu mô âm đạo trong băng gạc lấy từ kênh cổ tử cung chỉ ra vi phạm các quy tắc của sự lựa chọn của một mẫu sinh học.

Người ta nói rằng kiểm tra vi sinh trong trường hợp này thường được theo sau bởi một số vấn đề. Họ có liên quan đến thực tế là trong đường sinh dục dưới thường được trình bày một hệ vi sinh đa dạng khác nhau ở các độ tuổi khác nhau. Để nâng cao hiệu quả nghiên cứu và đã phát triển quy tắc chuẩn hóa.

Chẩn đoán nhiễm virus

Nó được thực hiện bằng các phương pháp phát hiện RNA và DNA mầm bệnh. Họ chủ yếu dựa trên việc xác định trình tự nucleotide trong tài liệu bệnh lý. Với mục đích này, các đầu dò phân tử. Chúng được sản xuất nhân tạo axit nucleic bổ sung cho (bổ sung cho) các axit virus dán nhãn với một nhãn phóng xạ hoặc biotin.

Các tính đặc thù của phương pháp này được lặp đi lặp lại việc sao chép các đoạn DNA cụ thể chứa một vài trăm (hoặc hàng chục) nucleotide cặp. sao chép (copy) là phần mở rộng có thể bắt đầu chỉ trong các đơn vị nhất định. mồi (primer) được sử dụng để tạo ra chúng. Họ là oligonucleotide tổng hợp.

PCR chẩn đoán (polymerase chain reaction) là đơn giản trong thực hiện. Phương pháp này cho phép bạn nhanh chóng có được kết quả bằng cách sử dụng một lượng nhỏ chất bệnh lý. Sử dụng PCR chẩn đoán xác định cấp tính, mãn tính và nhiễm trùng tiềm ẩn (ẩn).

Khi độ nhạy của phương pháp này được coi là thích hợp hơn. Tuy nhiên, hệ thống thử nghiệm hiện tại là không đáng tin cậy đủ, do đó việc chẩn đoán PCR không thể thay thế hoàn toàn các phương pháp truyền thống.